高爾夫球場(chǎng)草坪線蟲(chóng)病害實(shí)驗(yàn)室診斷與成功防治
1 線蟲(chóng)的特性和主要種類(lèi)
線蟲(chóng)是一種低等動(dòng)物，屬線形動(dòng)物門(mén)，線蟲(chóng)綱。在自然界中分布很廣，在水中、土壤和寄主中生活。有的在植物中寄生，也有的在動(dòng)物中寄生。在植物上寄生的線蟲(chóng)多為專(zhuān)性寄生。一般體形為圓筒狀，兩端尖。大多數(shù)為雌雄同形。體形細(xì)小，長(zhǎng)為0.030～0.16厘米。少數(shù)為雌雄異形，雌蟲(chóng)為梨形或腎形、球形或長(zhǎng)囊形。在線蟲(chóng)的口腔內(nèi)有口針或軸針，狀似注射器針頭，用以取食。在取食時(shí)，將口針刺入寄主細(xì)胞，并將唾液輸入寄主細(xì)胞，吮吸寄主汁液。被線蟲(chóng)取食后的植物組織會(huì)發(fā)生一些生理變化，也就是在一定程度上產(chǎn)生傷口，這種傷口會(huì)引起植物病原菌的寄生和其它腐生菌的侵入，引起發(fā)病。
根據(jù)線蟲(chóng)的取食方式，可分為兩大類(lèi)：一種是外寄生線蟲(chóng)，這類(lèi)線蟲(chóng)只有取食時(shí)才將口針穿刺到寄主植物的體內(nèi)，蟲(chóng)體外露，平時(shí)生活于土壤中。由于取食與棲息不在一處，它們經(jīng)常往返于土壤與植物根系之間，而且取食的植株不固定，一條線蟲(chóng)可以危害多株植物。在它們轉(zhuǎn)移危害時(shí)，線蟲(chóng)往往成為其它病害的傳播介體。 另一種是內(nèi)寄生線蟲(chóng)，蟲(chóng)在取食時(shí)必須進(jìn)入植物根內(nèi)部或其他組織內(nèi)部。
1.1 內(nèi)寄生線蟲(chóng)
1.2 粒線蟲(chóng)屬（Anguina）：大多寄生在禾本科植物的地上部，在莖葉上形成蟲(chóng)癭，或
者破壞子房后形成蟲(chóng)癭。
莖線蟲(chóng)屬（Ditylenchus）：危害多種植物的地下莖、球莖、塊莖、鱗莖，有的危害地上部葉、花、芽或嫩莖組織，受害后表現(xiàn)為壞死或誘發(fā)畸形病變。
滑刃線蟲(chóng)屬（Aphelenchoides）：有各種危害狀，劍葉干尖，干枯卷縮，葉片組織壞死。
異皮線蟲(chóng)屬（Heterodera）：又稱(chēng)胞囊線蟲(chóng)屬，危害植物的地下部，尤其是根部，病根發(fā)育不良，地上部表現(xiàn)植株矮小、枯黃，似缺肥癥狀。
根結(jié)線蟲(chóng)屬（Meloidogyne）：寄主范圍極廣，危害多種植物的根部，受害植物的根變成結(jié)狀或瘤狀腫大，削開(kāi)結(jié)狀組織皮層，仔細(xì)觀察，可見(jiàn)腫根內(nèi)有梨形的雌蟲(chóng)。受害植物地上部表現(xiàn)營(yíng)養(yǎng)不良、枯黃、矮小。
1.3 外寄生線蟲(chóng)
劍線蟲(chóng)屬（Xiphinema）：齒針很長(zhǎng)，基都球大，為瘤狀，導(dǎo)環(huán)位置低。
長(zhǎng)針線蟲(chóng)屬（Longidorus）：齒針很長(zhǎng)，基部球不大，導(dǎo)環(huán)位置高。
毛刺線蟲(chóng)屬（Trichodorus）：瘤針彎曲，基部漸粗，形似毛刺。
2.線蟲(chóng)的發(fā)生與環(huán)境
不同種類(lèi)的線蟲(chóng)對(duì)環(huán)境條件要求不同，適于線蟲(chóng)發(fā)育和孵化的溫度為20－30℃，溫度
太高（40－50℃）對(duì)線蟲(chóng)生長(zhǎng)不利，甚至可以致死。線蟲(chóng)在土壤或植物組織中產(chǎn)卵。孵化后形成幼蟲(chóng)，幼蟲(chóng)侵入寄主后為害。幼蟲(chóng)一般為害四次，即變成蟲(chóng)。交配后雄蟲(chóng)死亡，雌蟲(chóng)產(chǎn)卵，線蟲(chóng)完成其生活史的時(shí)間不同，一般為一個(gè)月左右，一年可繁殖十幾代。
不同種類(lèi)的線蟲(chóng)對(duì)土壤水分的要求不同。大多數(shù)線蟲(chóng)在較干旱的條件下有利于生長(zhǎng)繁殖；而有些線蟲(chóng)則在淹水條件下有利于生長(zhǎng)繁殖。線蟲(chóng)一般在沙壤土中發(fā)生嚴(yán)重，但有些線蟲(chóng)則在粘壤土中也發(fā)生嚴(yán)重。
3 線蟲(chóng)病害主要癥狀
線蟲(chóng)對(duì)作物的致病作用，除用口針刺傷寄主，產(chǎn)生傷口外，還有線蟲(chóng)在植物組織內(nèi)穿行所造成的機(jī)械損傷。另外線蟲(chóng)在用口針取食時(shí)分泌唾液，由于唾液中含有各種毒素和酶，使植株發(fā)生各種病變。線蟲(chóng)病害主要癥狀（1）植株生長(zhǎng)緩慢、色澤失常、葉片萎蔫與營(yíng)養(yǎng)不良癥狀相似，引起草坪稀疏，整體發(fā)黃；（2）局部畸形，植株或葉片干枯、扭曲、畸形、組織腐爛、軟化及壞死。莖葉上產(chǎn)生褐色斑點(diǎn)、籽粒變成蟲(chóng)癭膨大、須根叢生、根部腐爛
4 高爾夫草坪線蟲(chóng)病害的分離與診斷方法
植物寄生線蟲(chóng)主要存在于土壤和植物組織中，分離線蟲(chóng)的方法有許多，要根據(jù)線蟲(chóng)的種類(lèi)、研究目的等來(lái)選擇適宜的方法。植物寄生線蟲(chóng)的個(gè)體很小，除極少數(shù)可從植物組織中直接挑出以外，絕大多數(shù)需借助特定的工具和方法才能完成。線蟲(chóng)的分離主要是利用它的趨水性、大小、比重以及與其他雜質(zhì)的差異，采用過(guò)篩、離心、漂浮等措施，將線蟲(chóng)從植物組織、土壤中分離出來(lái)。
4.1 材料、試劑與儀器
(1) 實(shí)驗(yàn)材料 感染線蟲(chóng)病的植物病根、病土等。
(2) 儀器或?qū)嶒?yàn)用具 解剖鏡、漏斗分離裝置、漂浮分離裝置、淺盤(pán)分離裝置、紗布或銅紗、記數(shù)皿或平皿、小燒杯、小玻管、旋蓋玻璃瓶、40目和325目網(wǎng)篩、線蟲(chóng)濾紙、餐巾紙、挑針、竹針、毛針、毛筆等。
(3) 試劑 線蟲(chóng)固定液。
4.2 分離方法
(1) 直接觀察分離
對(duì)于個(gè)體較大的線蟲(chóng)如根結(jié)線蟲(chóng)、孢囊線蟲(chóng)、粒線蟲(chóng)的雌蟲(chóng)等，可直接用挑針從植物組織中挑取，也可在解剖鏡或擴(kuò)大鏡觀察下直接挑取，對(duì)于蟲(chóng)體稍小的線蟲(chóng)如莖線蟲(chóng)、粒線蟲(chóng)的雄蟲(chóng)和幼蟲(chóng)等，需在解剖鏡下，用竹針或毛針直接挑取。
取感染線蟲(chóng)的植物病根材料（若是干材料需用水浸泡過(guò)夜），剝開(kāi)皮層，觀察里面是否有針頭大小、乳白色發(fā)亮的顆粒狀物。用挑針挑取，置凹玻片上水滴中，在解剖鏡或顯微鏡下觀察是否為線蟲(chóng)雌蟲(chóng)。
(2) 漏斗分離法
該方法操作較簡(jiǎn)單，是目前從植物材料中分離線蟲(chóng)較好的方法。其裝置是將直徑10-15cm 的玻璃漏斗架在鐵架上，下面接一段約 10 cm 的橡皮管，橡皮管上裝一個(gè)彈簧夾。植物材料切碎用雙層紗布包好，浸在盛滿清水的漏斗中，靜止24h，由于趨水性和自身的重量，線蟲(chóng)就離開(kāi)植物組織或土壤，沉降到漏斗底部的橡皮管中。
(3) 培育分離法
對(duì)于用漏斗分離法不易分離到的線蟲(chóng)，如根結(jié)線蟲(chóng)和孢囊線蟲(chóng)的雄性成蟲(chóng)等，可采用培育分離法。從土壤中得到病根后要馬上沖洗和培育，因?yàn)?4h后，有50%的線蟲(chóng)會(huì)從根里爬出，沖洗時(shí)便被沖掉了。
(4) 淺盤(pán)分離法
該方法原理與漏斗分離法一樣，但分離效果更好，而且泥沙等雜物較少。用兩個(gè)不銹鋼淺盤(pán)套放在一起，上面一個(gè)是篩盤(pán)，它的底部是篩網(wǎng)，網(wǎng)目大小為10目/英寸，下面一個(gè)是稍大的盛水盤(pán)。也可在培養(yǎng)皿上放置一個(gè)稍小的做成淺盤(pán)狀的金屬網(wǎng)，網(wǎng)與培養(yǎng)皿底部保持一定距離。
(5) 漂浮器分離法
對(duì)于沒(méi)有活動(dòng)能力的孢囊線蟲(chóng)的孢囊可采用漂浮器分離法（Fenwick-Oostenbrink改良漂浮法），該法需要特制的分離裝置。分離時(shí)先將漂浮筒內(nèi)盛滿清水，將100g 風(fēng)干的土樣放在上篩中，用強(qiáng)水流沖洗土樣，使其全部洗到漂浮筒內(nèi)，并從環(huán)頸水槽流到承接的細(xì)篩（100目）中，再用細(xì)水流沖洗一會(huì)，使漂浮物全部流入細(xì)篩。將細(xì)篩中的孢囊等漂浮物用水洗入燒杯或三角瓶中，再倒入鋪有濾紙的漏斗中，用毛筆收集并觀察濾紙上的孢囊。漂浮分離的土樣必須要風(fēng)干，否則孢囊不能在水中漂浮，需用比重小于1的溶劑。
5 線蟲(chóng)危害的記載標(biāo)準(zhǔn)和分級(jí)
高爾夫球場(chǎng)草坪常見(jiàn)線蟲(chóng)危害的分級(jí)和記載標(biāo)準(zhǔn)
分級(jí)
根結(jié)線蟲(chóng)危害
的記載標(biāo)準(zhǔn)
胞囊線蟲(chóng)危害
記載標(biāo)準(zhǔn)
莖線蟲(chóng)危害
記載標(biāo)準(zhǔn)
0級(jí)
無(wú)根結(jié)
無(wú)胞囊，無(wú)病
無(wú)線蟲(chóng)
Ⅰ級(jí)
有少數(shù)根結(jié)
感染極輕微（1-5個(gè)胞囊）
有極少量線蟲(chóng)和卵
Ⅱ級(jí)
大部分根上有根結(jié)
輕微感染（6-20個(gè)胞囊）
有少量線蟲(chóng)和卵
Ⅲ級(jí)
在蟲(chóng)瘤上有再次根結(jié)
中度感染（胞囊在20個(gè)以上）
有很多線蟲(chóng)和卵
Ⅳ級(jí)
互相連接成為根結(jié)團(tuán)塊
嚴(yán)重感染
有大量線蟲(chóng)和卵
6 線蟲(chóng)病害的綜合防治
6.1合理施肥
注意合理施肥與適時(shí)澆水，每年的3-6月和9-11月，根據(jù)往年的線蟲(chóng)發(fā)生的情況，要勤施磷肥和鉀肥，輕施氮肥，深澆水，可以減少線蟲(chóng)危害的發(fā)生。
6.2 藥物防治
選用線蟲(chóng)凈、熒光桿菌（Bacillus fluorescens）、巴斯德氏芽菌屬、二硫代氨基甲酸鹽（酯）類(lèi)、土壤熏蒸劑等進(jìn)行防治。線蟲(chóng)凈屬環(huán)保型線蟲(chóng)防治專(zhuān)用產(chǎn)品，噴施1000倍稀釋藥液量300-500ml/m2，嚴(yán)重時(shí)噴施稀釋藥液500-1000ml/m2，10天內(nèi)連用2-3次，能明顯控制線蟲(chóng)的危害。
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