矮牽�？焖俜敝臣夹g(shù)
1 材料與方法
1 1 外植體及處理.外植體來自東方花卉種苗公司.的矮牽牛( 品種 夢境! ) 種子。挑選.顆粒大且飽滿的種子, 先用飽和洗.衣粉水浸后自來水沖洗, 置于潔凈工.作臺上, 用01%升汞消毒6 min, 然后.用無菌水沖洗5 次, 每次5 min。.
1 2 培養(yǎng)條件.啟動、誘導(dǎo)分化、繼代增殖、壯.苗培養(yǎng)均以MS 為基本培養(yǎng)基, 添.加不同濃度的6BA、NAA 和3%蔗.糖; 生根培養(yǎng)以1/ 2MS, 分別添加不同濃度的NAA、IBA 和2%蔗糖。以.上培養(yǎng)基瓊脂用量0 7%, pH 值5 7,.121 ? 條件下蒸汽高壓滅菌20 min, 培.養(yǎng)過程溫度保持在( 25 # 1) ? , 光照.12 h/ d, 光照度30~ 4 0 mol/ m2 / s。.
1 3 培養(yǎng)過程.經(jīng)消毒的種子接種于啟動培養(yǎng).基, 先用報紙遮住進行暗培養(yǎng), 待種.子萌發(fā)后置全光下培養(yǎng)。21 d 后長.到1~ 3 cm 高時切去根部, 種苗切.成0 5 cm 莖段, 轉(zhuǎn)瓶接種至誘導(dǎo)分.化培養(yǎng)基, 21 d 后將發(fā)育成叢生狀.不定芽, 經(jīng)分割轉(zhuǎn)瓶接種至繼代增.殖培養(yǎng)基, 再經(jīng)過14~ 21 d 培養(yǎng), 叢.芽轉(zhuǎn)瓶接種到壯苗基( MS) , 14 d 后.將高1~ 1 5 cm 無根苗切下轉(zhuǎn)瓶接.種生根培養(yǎng)基, 14 d 后出室煉苗1~ 2.d, 用鑷子輕輕取出洗去根部培養(yǎng)基,.移栽至泥炭與椰糠各半的混合基質(zhì).中, 較后用0 1%多菌靈溶液噴淋定.根, 在保溫( 16~ 25 ) 、保濕( 較好90% 以上) 、遮蔭( 45% ~ 65% ) 條件下, 21 d 后生出新的白根、萌出新葉,.移栽成活率在95%以上。.
2 結(jié)果與分析
2 1 不同濃度NAA 對種子萌發(fā)生.長的影響.5~ 8 d 后大多數(shù)種子已經(jīng)萌.芽, 掀去報紙結(jié)束暗培養(yǎng), 置全光下.培養(yǎng), 14 d 左右出現(xiàn)真葉, 21 d 后調(diào).查種苗生長發(fā)育情況。試驗結(jié)果表.明, 培養(yǎng)基MS+ NAA0 1 mg / L 明.顯優(yōu)于MS。.
2 2 不同濃度6BA、NAA 對不定.芽繼代增殖的影響.不同濃度6BA 對不定芽的增殖.有重要影響, 隨著6BA 濃度的增加,.分化不定芽數(shù)量隨著增加, 但芽苗越.來越細小, 不利于下階段的壯苗、生.根培養(yǎng)。結(jié)果表明, MS + 6BA05.mg/ L+ NAA0 1 mg/ L 繼代培養(yǎng)的.芽苗數(shù)量多且粗壯, 有利于培養(yǎng)有效.苗, 為較佳繼代增值培養(yǎng)基。.
2 3 不同濃度NAA、I BA 對無根.苗生根的影響.
在不加6BA 的生根試驗中, 添.加IBA 明顯好于NAA, 不僅生根率.高, 而且不定根數(shù)量多, 生根快( 7 d.見根點) , 根系發(fā)育良好, 移栽易成.活等優(yōu)點。結(jié)果表明, 1/ 2MS +.IBA0 1 mg/ L 為較佳生根培養(yǎng)基。.
3 結(jié)論.
( 1) 利用矮牽牛種子進行組培.快繁的較佳培養(yǎng)基為: ? 啟動、壯苗.培養(yǎng)基均為MS; % 誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基.MS + 6BA1 0 mg/ L + NA A0 1.mg/ L; & 繼代增殖培養(yǎng)基MS + 6.BA0 5 mg / L + NAA0 1 mg/ L; ?.生根培養(yǎng)基1/ MS+ IBA0 1 mg/ L。
( 2) 種子消毒處理更容易建立.無菌系, 挑選種子應(yīng)注意粒大飽滿。.用種子作快繁材料未見報道。.
( 3) 與NAA 相比, IBA 更利于.矮牽牛生根的誘導(dǎo), 產(chǎn)生的不定根.數(shù)量多, 生根快。
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